人不同程度疲劳状态唾液蛋白标志物的肽谱研究

中国全科医学 ›› 2020, Vol. 23 ›› Issue (36): 4597-4603.

人不同程度疲劳状态唾液蛋白标志物的肽谱研究

许岩丽1，肖迪2，张慧芳2，尹天露3，何利华2，高晓欢4，顾一心2，彭贤惠2，刘志军3，张建中2*

1.056002河北省邯郸市，河北工程大学医学院　2.102206北京市，中国疾病预防控制中心传染病预防控制所　3.056000河北省邯郸市，河北工程大学附属医院　4.100053北京市，北京华卫通科医学研究中心
*通信作者：张建中，研究员；E-mail：zhangjianzhong@icdc.cn
注：本文部分内容首次发表于Exp Ther Med，2019，17（4）：2995-3002.

出版日期:2020-12-20 发布日期:2020-12-20
基金资助:
国家自然科学基金面上项目（81373095）——人唾液生物标志物筛选和评价研究；河北省教育厅重点项目（ZD2020334）——人唾液生物标志物快捷检测和应用研究

Study on the Peptide Spectrum of Saliva Protein Markers in Different Degrees of Fatigue　

XU Yanli1，XIAO Di2，ZHANG Huifang2，YIN Tianlu3，HE Lihua2，GAO Xiaohuan4，GU Yixin2，PENG Xianhui2，LIU Zhijun3，ZHANG Jianzhong2*

1.Medical College，Hebei University of Engineering，Handan 056002，China
2.China Center for Diseases Prevention and Control of Infectious Diseases，Beijing 102206，China
3.Affiated Hospital，Hebei University of Engineering，Handan 056000，China
4.Beijing Huawei Tongke Medical Research Center，Beijing 100053，China
*Corresponding author：ZHANG Jianzhong，Researcher；E-mail：zhangjianzhong@icdc.cn

Published:2020-12-20 Online:2020-12-20

摘要/Abstract

摘要： 目的　利用目前比较成熟的唾液飞行时间质谱分析技术探索疲劳状态与非疲劳状态下有差异的大分子量肽段，为研究疲劳更加便捷稳定的标志物提供重要的理论基础。方法　采集10名健康志愿者唾液样本，采用磁珠富集（MB）和原液直接检测两种样品处理方式进行飞行时间质谱分析，以MB的唾液质谱和离心后直接取上清液（原液）的唾液质谱建模。结果　磁珠和直接采样均在2 000~15 000 Da具有很好的谱图，富集会丢失部分峰。每个人早、晚的谱图均有差异，由于样本份数有限，暂未行交叉验证，因此每个样本采两张谱图，早晚各用20张谱图进行建模分析：在原液样本两组间发现3个差异肽。MB模型的交叉效度为92.06%，原液模型的交叉效度为95.49%。结论　人不同程度疲劳状态唾液蛋白标志物的肽谱在分子量2 000~15 000 Da范围内有差异峰，为进一步实现基于生物传感器技术等的便捷疲劳检测方法提供科学依据，具有重要的理论和现实意义。

关键词: 疲劳, 磁珠, 生物标志物, 唾液, 肽图谱

Abstract: Objective　In order to provide a reference basis for exploring convenient and stable fatigue markers，we studied various high-molecular-weight peptide fragments under the fatigue state and non-fatigue state using in the saliva using time of flight mass spectrometry.Methods　The saliva samples were collected from 10 healthy volunteers and the flight time of mass spectrometry was conducted using two kinds of sample treatment methods，the magnetic beads enrichment（MB） and direct detection of stock solution.This was followed by modeling via the mass spectrums of MB and supernatant（stock solution） directly collected after centrifugation.Results　Both MB and direct sampling produced good spectrograms between 2 000 and 150 00 Da，while some peaks were lost in the enrichment.The early and late spectrograms were different in each individual.Due to the limited sample size，the cross validation was not conducted，however two spectrograms were taken for each sample，and 20 early and 20 late spectrograms were used for modeling analysis.Three differential peptides was found in the two groups of stock solution samples.The cross validity of MB model was 92.06%，while that of stock solution model was 95.49%.Conclusion　There were differential peaks within the molecular weight of 2 000-15 000 Da，in different degrees of fatigue which provided a scientific basis for further realization of the convenient fatigue detection method based on biosensor technique，with important theoretical and practical significance.

Key words: Fatigue, Magnetic bead, Biomarkers, Saliva, Peptide mapping

许岩丽,肖迪,张慧芳,等. 人不同程度疲劳状态唾液蛋白标志物的肽谱研究[J]. 中国全科医学, 2020, 23(36): 4597-4603.
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