中国全科医学 ›› 2015, Vol. 18 ›› Issue (14): 1663-1666.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.14.015

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启膈散乙酸乙酯提取物对食管癌Eca9706细胞增殖和凋亡的影响

尹素改,王慧慧,吴耀松,陈玉龙   

  1. 450046河南省郑州市,河南中医学院科研处分子生物实验中心;通信作者:陈玉龙,450046河南省郑州市,河南中医学院科研处分子生物实验中心;E-mail:cyl172621@163.com
  • 出版日期:2015-05-15 发布日期:2015-05-15
  • 基金资助:
    国家自然科学基金面上项目(81173177);河南省高等学校重点科研项目(15A310020)

  • Published:2015-05-15 Online:2015-05-15

摘要: 目的  探讨启膈散乙酸乙酯提取物对食管癌Eca9706细胞增殖和凋亡的影响。方法  按沙参∶丹参∶茯苓∶川贝母(去心)∶郁金∶砂仁壳∶杵头糠=6∶6∶2∶3∶1∶1∶1的比例配制启膈散,每克药物配10ml的比例加入95%乙醇溶液,用旋转蒸发仪浓缩药液,浓缩液与乙酸乙酯按体积比2∶1进行萃取,获取启膈散乙酸乙酯提取物。Eca9706细胞与浓度分别为12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/ml的启膈散提取物共培养,MTT法检测启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率。Eca9706细胞与35%抑制浓度(IC35)、50%抑制浓度(IC50)和70%抑制浓度(IC70)的启膈散提取物共培养,采用流式细胞仪检测启膈散提物对Eca9706细胞的凋亡率。结果  不同浓度启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。启膈散提取物对Eca9706细胞的抑制率与启膈散提取物浓度拟合曲线方程为Y=-1.835×10-5X2+0.006X+0.185,R2=0.996,概率法计算IC35为22.8μg/ml,IC50为81.8μg/ml,IC70为162.2μg/ml。显微镜下观察,随着启膈散提取物浓度的增加,细胞变圆、变小,贴壁细胞数目逐渐减少,细胞间隙增大,细胞碎片增多。IC35、IC50和IC70启膈散提取物对Eca9706细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.001)。激光共聚焦显微镜下显示,启膈散提取物作用于Eca9706细胞后,部分细胞膜呈绿色,提示早期凋亡;部分细胞膜呈绿色,且细胞核呈红色,细胞体积变小、变圆,形成凋亡小体,提示晚期凋亡细胞。结论  启膈散乙酸乙酯提取物可抑制食管癌Eca9706细胞增殖,诱导细胞凋亡。

关键词: 食管肿瘤, 启膈散, 细胞增殖, Eca9706细胞, 细胞凋亡