摘要： 目的  通过研究噎膈血瘀证、脾气虚证患者及健康人血清对食管癌EC9706细胞增殖、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/核因子kappaB（NF-κB）信号通路相关分子mRNA及蛋白表达的调控，探讨噎膈血瘀证、脾气虚证的分子机制。方法  本研究于2014年6-12月选择来源于唐山市人民医院、迁安燕山医院肿瘤内科的病理确诊的食管鳞癌患者。按照《中华人民共和国中医药行业标准——中医病症诊断疗效标准》确定噎膈血瘀证或脾气虚证标准，选取血瘀证、脾气虚证患者各10人，另选取健康志愿者10人（来自两院体检人员）。将EC9706细胞于37 ℃，5%饱和湿度的二氧化碳（CO2）培养箱孵育24 h，饥饿24 h，分别加入倍比梯度的噎膈血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清，噻唑蓝（MTT）染色法检测细胞增殖变化；实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测PI3K、Akt、NF-ｋB表达；免疫印迹（Western blot）法检测PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子蛋白表达。结果  血瘀证患者血清刺激细胞的50%增殖率为71.1 μl/ml，脾气虚证为118.0 μl/ml；血瘀证患者血清上调细胞PI3K、Akt和NF-κB mRNA表达水平，与各对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，脾气虚证患者血清无上调mRNAs作用；血瘀证患者血清促进细胞表皮生长因子受体（EGFR）、PI3K、Akt、磷酸化的蛋白激酶B（p-Akt）和 NF-κB等蛋白表达水平增高，与各对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，脾气虚证患者血清无促进此五蛋白表达作用。结论  噎膈血瘀证患者血清能够促进细胞增殖，该证候的分子机制可能与PI3K/Akt/NF-κB信号通路过度激活有关；脾气虚证患者血清无刺激细胞增殖作用，其证候分子机制有待探讨。

关键词: 食管肿瘤, 血瘀证, 脾气虚证, 血清, EC9706细胞