摘要： 目的  研究六味地黄丸含药血清（MSLDP）对β-淀粉样蛋白（Aβ）25-35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）的保护作用，探讨六味地黄丸在防治阿尔茨海默病（AD）中的作用机制。方法  2012年3月-2013年4月选取SPF级雄性SD大鼠20只，按照随机数字表法将20只雄性SD大鼠分为对照组、给药组，每组10只。制备MSLDP及Aβ25-35母液备用。根据Aβ25-35、MSLDP不同干预浓度将处于对数生长期PC12细胞分为0、10、20、40 μmol/LAβ25-35组和0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组，另取处于对数生长期PC12细胞分为正常对照组（不加Aβ25-35和MSLDP）、模型组（加入20 μmol/L Aβ25-35制备AD模型)、MSLDP干预组（加入20% MSLDP+20 μmol/L Aβ25-35)，显微镜下观察0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组及正常对照组、模型组、MSLDP干预组PC12细胞形态。采用 MTT法检测PC12细胞存活率，同上分组方法及步骤采用Western blotting法检测 PC12细胞血管内皮生长因子B（VEGF-B）蛋白表达水平。结果  0 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于10、20、40 μmol/L Aβ25-35组（P＜0.05）；10 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于20、40 μmol/L Aβ25-35组（P＜0.05）；20 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于40 μmol/L Aβ25-35组（P＜0.05）。0、10 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于20、40 μmol/L Aβ25-35组（P＜0.05）；20 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于40 μmol/L Aβ25-35组（P＜0.05）。0%MSLDP组PC12细胞存活率低于2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组（P＜0.05）；2.5%MSLDP组PC12细胞存活率低于5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组（P＜0.05）；5.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组（P＜0.05）；10.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于20.0%、30.0%MSLDP组（P＜0.05）。20.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于30.0%MSLDP组（P＜0.05）。显微镜下示0%MSLDP组PC12细胞形态规则，大小均一；2.5%、5.0%MSLDP组PC12细胞数目增多，形态正常；10.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长；20.0%、30.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长，边缘长出小的棘突，具有分化趋势。0%、2.5%、5.0% MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组（P＜0.05）；10.0%MSLDP 组VEGF-B蛋白表达水平低于20.0%MSLDP组（P＜0.05）；20.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平高于30.0%MSLDP组（P＜0.05）。正常对照组、MSLDP干预组PC12细胞存活率高于模型组（P＜0.05）。显微镜观察示正常对照组细胞形态规则，大小均一；模型组细胞数量减少，形态不规则，呈凋亡或死亡的萎缩状，有细胞碎片；MSLDP干预组细胞数量明显增多，部分细胞呈拉伸状有棘突。正常对照组VEGF-B蛋白表达水平高于模型组和MSLDP干预组（P＜0.05）；模型组VEGF-B蛋白表达水平低于MSLDP干预组（P＜0.05）。结论  MSLDP可增加 Aβ25-35损伤的 PC12细胞的活性，并对PC12细胞具有保护作用，其机制可能与其可增加VEGF-B蛋白表达水平有关。

关键词: 阿尔茨海默病, 六味地黄汤, 血管内皮生长因子类, 淀粉样&beta, 肽类