中国全科医学 ›› 2015, Vol. 18 ›› Issue (27): 3308-3313.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.27.011
韩明,程鑫,赵荣荣,张仕状
摘要: 目的 探讨壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法 2014年9月-2015年4月,收集对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞进行实验,将96孔板的第2~9列作为腺嘌呤组〔加入腺嘌呤的浓度分别为0.500 00、0.250 00、0.125 00、0.062 50、0.031 25、0.015 63、0.007 81、0.003 91 mg/ml(分别记为A组~H组)〕,第10列作为对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),第11列作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度腺嘌呤组不同时间(培养24、48、60 h)抑瘤率及腺嘌呤组半抑制浓度(IC50)。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组(加入0.500 00 mg/ml的腺嘌呤)和对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),采用透射电镜观察细胞超微结构。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组(加入0.500 00 mg/ml的腺嘌呤)和对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),采用流式细胞仪检测细胞周期。结果 24 h时,B组~H组抑瘤率均低于A组,C组~H组抑瘤率均低于B组,D组~H组抑瘤率均低于C组,E组~H组抑瘤率均低于D组,E组~G组抑瘤率均高于H组(P<0.05);48 h时,B组~H组抑瘤率均低于A组,C组~H组抑瘤率均低于B组,D组~H组抑瘤率均低于C组,D组、E组抑瘤率均高于H组(P<0.05);60 h时,B组~H组抑瘤率均低于A组,C组~H组抑瘤率均低于B组,D组~H组抑瘤率均低于C组,D组~F组抑瘤率均高于G组和H组(P<0.05)。C组、E组~H组24 h时抑瘤率均低于48 h时抑瘤率,A组~F组24 h时抑瘤率均低于60 h时抑瘤率,G组24 h时抑瘤率高于60 h时抑瘤率,A组~D组48 h时抑瘤率均低于60 h时抑瘤率,G组、H组48 h时抑瘤率高于60 h时抑瘤率(P<0.05)。不同时间IC50比较,差异有统计学意义(F=16.816,P<0.001);48 h、60 h时IC50低于24 h时,60 h时IC50低于48 h时(P<0.05)。腺嘌呤作用48h后,肝癌细胞出现明显的线粒体改变。对照组G0/G1期、G2/M期人肝癌Bel-7402细胞数高于腺嘌呤组,S期人肝癌Bel-7402细胞数低于腺嘌呤组(P<0.05);腺嘌呤组S期人肝癌Bel-7402细胞数高于G0/G1期,G2/M期人肝癌Bel-7402细胞数低于S期(P<0.05)。结论 腺嘌呤抑制人肝癌细胞的增殖且呈一定的浓度、时间依赖性。腺嘌呤可引起人肝细胞线粒体改变,可将肿瘤细胞阻滞于S期并进一步诱导其凋亡进而发挥抗肿瘤作用。