中国全科医学 ›› 2017, Vol. 20 ›› Issue (21): 2635-3639.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2017.05.y11

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黄芪甲苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究

赵静苗,胡继宏*,王秋萍   

  1. 730000甘肃省兰州市,甘肃中医药大学甘肃重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室
    *通信作者:胡继宏,副教授;E-mail:hujihonghappy@163.com
  • 出版日期:2017-07-20 发布日期:2017-07-20
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(81260597)

  • Published:2017-07-20 Online:2017-07-20

摘要: 目的  探讨黄芪甲苷(AST)诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的作用。方法  对第2代BMSCs进行传代培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度AST在24、48、72 h时对BMSCs的增殖作用。取第4代BMSCs分为BMSCs组、5-氮杂胞苷组(5-AZA组)和AST组,5-AZA组和AST组分别加入浓度为10 μmol/L的5-AZA和浓度为100 μmol/L的AST诱导液进行诱导,采用荧光倒置相差显微镜观察诱导后各组细胞的形态变化。通过Real-time qPCR法检测诱导后各组结蛋白(Desmin)、α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、肌钙蛋白I(cTnI)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测各组肌钙蛋白T(cTnT)表达水平。结果  100 μmol/L AST亚组孔72 h时BMSCs增殖情况好于24、48 h时及其他浓度AST亚组孔各时间点(P<0.05)。荧光倒置相差显微镜观察显示AST体外诱导SD大鼠BMSCs形态分化类似心肌样细胞。5-AZA组、AST组Desmin、α-SCA、cTnI mRNA表达水平表达高于BMSCs组(P<0.05),且AST组以上蛋白mRNA表达水平高于5-AZA组(P<0.05)。与BMSCs组组比较,5-AZA组和AST组cTnT表达水平升高(P<0.05);与5-AZA组比较,AST组cTnT表达水平下降(P<0.05)。结论  浓度为100 μmol/L的AST作用72 h时能够在体外诱导BMSCs向心肌样细胞分化,但分化效果弱于5-AZA。

关键词: 肌细胞, 心脏, 细胞分化, 骨髓间充质干细胞, 黄芪甲苷