中国全科医学 ›› 2015, Vol. 18 ›› Issue (32): 3964-3968.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.32.016
苗学红，王淑玲
摘要： 目的 探讨补肾疏肝方对肺腺癌A549细胞的凋亡作用，对肿瘤坏死因子（TNF）-α分泌、Survivin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3 mRNA表达的影响。方法 将补肾疏肝方制成低剂量（1.25 g/ml）、中剂量（2.50 g/ml）和高剂量（3.75 g/ml）药液。以随机数字表法将大鼠分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、顺铂（DDP）组、联合组（中剂量药液联合DDP），每组10只。对照组于第1～5天给予0.9%氯化钠溶液4 ml/d灌胃；低剂量组、中剂量组、高剂量组于第1～5天给予相应剂量药液4 ml/d灌胃；DDP组分别于第1、3、5天腹腔注射2 ml DDP（20%）；联合组于第1～5天给予中剂量灌胃药液灌胃4 ml/d及第1、3、5天腹腔注射2 ml DDP（20%）。末次给药2 h后采血，分离血清。A549细胞分别加入各组血清，培养72 h，倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡情况。A549细胞分别加入各组血清，培养24、48、72 h后，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测TNF-α水平。A549细胞与各组血清共培养72 h后，采用荧光定量PCR检测Survivin mRNA、Caspase-3 mRNA的相对表达量。结果 各组血清作用于A549细胞72 h后，凋亡细胞核固缩，且随药液浓度增加凋亡细胞增多。各组血清作用于A549细胞24、48、72 h后TNF-α分泌水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。其中，低剂量组、中剂量组、高剂量组、DDP组和联合组作用于A549细胞24、48、72 h后TNF-α分泌水平高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。各组血清作用于A549细胞72 h后Survivin mRNA相对表达量比较，差异有统计学意义（F=13.238，P＜0.05）。其中，高剂量组、DDP组和联合组血清作用于A549细胞72 h后Survivin mRNA相对表达量低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。各组血清作用于A549细胞72 h后Caspase-3 mRNA相对表达量比较，差异有统计学意义（F=10.814，P＜0.05）。其中，中剂量组、高剂量组、DDP组和联合组血清作用于A549细胞72 h后Caspase-3 mRNA相对表达量高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 补肾疏肝方可促进肺腺癌A549细胞凋亡，其机制可能与抑制Survivin基因表达、促进TNF-α分泌和Caspase-3基因表达有关。
