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               我国是结核病和糖尿病高负担国家                ［1］ ，耐药结核        因 -15 位碱基、KatG 基因 315 位氨基酸；利福平 rpoB
           病（drug resistant tuberculosis，DR-TB）是当前全球健          基因 RRDR 区、rpoB 基因 516 位氨基酸、rpoB 基因 526
           康的一个严重威胁，其发病率、病死率高，治疗复杂，                            位氨基酸、rpoB 基因 531 位氨基酸；乙胺丁醇 embB 基
           花费巨大    ［2］ ，是人类战胜结核病的重大阻碍。临床上                      因 306 位氨基酸；链霉素 rpsL 基因 43 位氨基酸、rpsL
           糖尿病合并肺结核很常见。近年来，国内外在糖尿病对                            基因 88 位氨基酸。
           肺结核耐药率、疗效差异、复发率等方面有一些临床研                            1.5 耐药定义 根据《耐药结核病化学治疗指南（2019
           究，但结论并不统一         ［3-4］ 。有研究发现合并糖尿病的                年简版）》     ［10］ 定义，单耐药结核病：结核病患者感染
           肺结核（DM-PTB）比单纯肺结核（PTB）有更高的异                         的结核分枝杆菌经体外药敏试验被证实对一种一线抗结
           烟肼耐药率，但利福平耐药无差异                ［5］ ，也有研究表明          核药物耐药。多耐药结核病：结核病患者感染的结核分
           DM-PTB 的耐药率与 PTB 无差异        ［6］ 。国外有研究发现            枝杆菌经体外药敏试验被证实对一种以上一线抗结核药
           DM-PTB 患者异烟肼、利福平和吡嗪酰胺的耐药率较高，                        物耐药（但不包括同时对异烟肼、利福平耐药）。耐多
           相较于 PTB 更有可能出现耐多药结核病               ［7］ 。通过查阅        药结核病（MDR-TB）：结核病患者感染的结核分枝杆
           文献发现，既往研究多以回顾性研究为主，糖尿病对肺                            菌经体外药敏试验被证实至少同时对异烟肼和利福平
           结核菌株表型耐药、基因突变影响的前瞻性对比研究尚                            耐药。
           少。为进一步探究糖尿病对肺结核耐药的影响，本研究                            1.6 统计学方法 采用 SPSS 25.0 软件包进行统计学
           前瞻性地对 DM-PTB 及 PTB 患者进行表型耐药、基因                      分析，计量资料进行正态分布检验，偏态分布的计量
           突变检测，旨在为后续研究提供参考。                                   资料以 M（P 25 ，P 75 ）表示，两组间比较采用非参数检
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           1 对象与方法                                             验；计数资料以相对数表示，组间比较采用 χ 检验或
           1.1 研究对象 选取 2018—2020 年在简阳市人民医院                     Fisher's 确切概率法。以 P<0.05 为差异有统计学意义。
           就诊的结核分枝杆菌培养阳性的肺结核患者 357 例，                          2 结果
           根据是否合并糖尿病，将其分为 PTB 组 216 例和 DM-                     2.1 一般情况 患者入组流程见图 1。PTB 组男 162 例，
           PTB 组 141 例。本研究通过简阳市人民医院伦理委员会                       女 54 例；中位年龄 52（34，65）岁。DM-PTB 组男 124 例，
           伦理审核〔编号：（2018）19〕，已在中国临床试验注                         女 17 例；中位年龄 53（39，61）岁。两组年龄比较，
           册中心注册，注册号：ChiCTR2000039148。                         差异无统计学意义（Z=-1.78，P=0.07）。两组性别比较，
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           1.2 纳入与排除标准 纳入标准：符合《肺结核诊断：                          差异有统计学意义（χ =8.97，P=0.003）。
           WS 288—2017》中的涂片阳性肺结核诊断标准                ［8］ ；符     2.2 抗结核药耐药及基因位点突变情况
           合《中国慢性疾病防治基层医生诊疗手册（糖尿病分册）                           2.2.1 一线药物耐药结果 两组利福平、乙胺丁醇、
           2015 年版》中的糖尿病诊断标准            ［9］ ：有糖尿病典型症           链霉素耐药率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；
           状，空腹静脉血糖 >7.0 mmol/L，随机或空腹葡萄糖耐                      DM-PTB 组异烟肼耐药率高于 PTB 组，差异有统计学
           量试验（OGTT）2 h 静脉血糖 >11.1 mmol/L；若无症状，                意义（P<0.05），见表 1。
           需非同日 2 次检测明确。排除标准：菌种鉴定为非结核                          2.2.2 不同类型耐药结果 两组患者异烟肼、利福平、
           分枝杆菌。                                               链霉素单耐药率以及多耐药率比较，差异均无统计学意
           1.3 材料与方法 试剂及设备：结核分枝杆菌菌种鉴                           义（P>0.05）；DM-PTB 组耐多药率高于 PTB 组，差异
           定采用美国 BD 公司 BACTEC MGIT960 System 全自动分              有统计学意义（P<0.05），见表 2。
           枝杆菌培养系统。采用异烟肼、乙胺丁醇、利福平、链                            2.2.3 检测基因位点突变结果 两组患者检测基因位点
           霉素药敏试剂盒（荧光法）进行表型药物敏感试验（简                            突变率比较，差异均无统计学意义（P>0.05），见表 3。
           称：药敏试验）。分子检测试剂：结核分枝杆菌耐药基                            2.2.4 一线抗结核药耐药基因位点突变分布 PTB 组
           因突变检测试剂盒（PCR- 反向点杂交法），由亚能生                          异烟肼耐药位点均为 KatG 基因 315 位氨基酸 S315T/N
           物技术（深圳）有限公司提供；伯乐基因扩增仪（仪器                            位点突变 5 例（5/5）；利福平耐药位点为 rpoB 基因
           型号 S1000）。                                          RRDR 区 6 例（6/15），rpoB 基因 526 位氨基酸 H526D
           1.4 试验方法 从门诊、住院的患者中筛查痰抗酸染                           位点突变 4 例（4/15），rpoB 基因 531 位氨基酸 S531L
           色阳性患者，记录患者年龄、性别、是否合并糖尿病，                            位点突变 5 例（5/15）；链霉素耐药位点 rpsL 基因 43
           取晨痰送结核分枝杆菌培养进行菌株鉴定。培养为阳性                            位氨基酸 K43R 位点突变 2 例（2/3），rpsL 基因 88 位
           且鉴定为结核分枝杆菌的标本继续进行药敏试验。PTB                           氨基酸 K88R 位点突变 1 例（1/3）。
           组随机抽样选择 62 例、DM-PTB 组随机选择 61 例进行                        DM-PTB 组异烟肼耐药位点均为 KatG 基因 315 位
           耐药基因位点突变检测，检测位点包括异烟肼 inhA 基                         氨基酸 S315T/N 位点突变 7 例（7/7）；利福平耐药位
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