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法测试盒（WST-1 法）（武汉伊莱瑞特生物科技有限 模型不纳入本次实验研究。
公司，E-BC-K020）；丙二醛比色法测试盒（TBA 法） 1.5 干预方法
［14］
（武汉伊莱瑞特生物科技有限公司，E-BC-K025-M）。 1.5.1 电针组 腧穴定位：参考《实验针灸学》 和《实
1.3 动物模型制备 验动物常用穴位名称与定位第２部分：大鼠》 ［15］ 并模
1.3.1 MCAO 模型 ［12］ （1）术前准备：适应性饲养 拟人体腧穴骨度分寸法定位取穴：神庭穴位于大鼠头前
大鼠至目标体质量（270~280 g），术前将造模动物禁 正中线，额顶骨缝交界线前方；百会穴位于大鼠头部前
食 12 h、自由饮水。准备好分离动脉所需的物品，造模 正中线，双耳尖连线中点。
由 2 名经培训的手法基本一致的实验人员同时进行，以 电针方法：术后第 1 天开始电针治疗，选用直径
避免因造模不同引起的误差。（2）麻醉：大鼠抓取尾部， 0.3 mm 的环球无菌针灸针分别刺入神庭穴（向上斜刺，
将其放在电子秤上称量体质量，称重后按照 3.5 ml/kg 深度约 2 mm）、百会穴（向前斜刺，深度约 2 mm），
的剂量用 10% 的水合氯醛进行腹腔注射麻醉，检查大 进针后连接 SDZ- Ⅱ型华佗电子针疗仪，疏密波频率为
鼠角膜反射，消失为麻醉成功的标志。麻醉时注意进针 1 Hz/20 Hz，强度以针体轻轻抖动、动物耐受为度，1次/d，
的深度和角度，避免造成动物意外死亡。（3）分离动 30 min/ 次，连续治疗 2 周，直至动物被处死。针刺干
脉：麻醉成功后用剃毛器将 SD 大鼠颈前部的皮毛剃去， 预由同一人员进行操作。
将其仰卧位固定在大鼠固定板上，用碘伏、医用乙醇消 1.5.2 模型组和假手术组 术后于笼中饲养，除同等条
毒后备皮，在颈中线稍偏左侧做 1 个 4 cm 左右的切口， 件抓取固定 30 min 外，不给予任何干预措施。
钝性逐层分离皮下组织，找到并将颈总动脉与迷走神经 1.6 检测指标与方法
分离，并在颈总动脉近心端处预留结扎线。沿颈总动 1.6.1 Morris 水迷宫实验 Morris 水迷宫实验设置参照
脉向远心端找到颈内动脉与颈外动脉的分叉并将两者分 设备说明书和参考文献［16］设置，主要包括定位航行
离。在颈外动脉远心端处预留结扎线，在颈外动脉近心 和空间探索两部分实验。
端、颈总动脉近心端处结扎颈外动脉与颈总动脉。（4） 定位航行实验：在动物每天电针治疗结束后，分上、
插栓：用动脉夹夹闭颈内动脉远心端，左手持弯镊将颈 下午 2 个时段训练，每次训练将动物面朝池壁从 4 个不
总动脉结扎处与分叉处撑起，右手用显微剪刀在距离颈 同的象限依次放入水迷宫中，记录从不同象限将动物放
内与颈外动脉分叉 1 cm 处剪 V 型切口，将线栓从颈总 入后，动物找到逃生平台的时间（即逃避潜伏期）；动
动脉切口处经分叉插入 18~20 mm，稍感有阻力时即可 物如果在 90 s 内找到逃生平台，并在其上停留 3 s 以上，
停止插栓，用 3-0 的缝合线结扎 V 型切口处并记录下 则认为动物找到逃生平台；如果动物在 90 s 内未找到逃
插栓时间，消毒后将皮肤切口缝合。切记留 1 cm 线栓 生平台，则由实验者借助外物对动物进行引导，找到逃
在皮肤外。（5）再灌注：线栓插入 2 h 后，小心将线 生平台并熟悉 10 s，此时动物的逃避潜伏期界定为 90 s。
栓退至分叉处，以实现缺血再灌注。在手术期间及术后， 此部分实验时间从电针治疗第 9 天开始，第 13 天结束，
室温保持在 25 ℃左右，同时采用电热毯维持大鼠肛温 持续 5 d。
在（37±1）℃，直至大鼠麻醉苏醒，恢复意识。 空间探索实验：本实验于第 14 天电针治疗结束后
1.3.2 假手术组模型制备 大鼠仅做颈部皮肤切开，分 进行。撤掉池壁内的逃生平台，将大鼠按照相同的操作
离颈总动脉、颈内动脉与颈外动脉，然后消毒切口、缝 从离原平台位置最远象限投入池内，并记录动物在 90 s
合皮肤。 内穿越逃生平台的次数。
1.3.3 造模后处理 术后麻醉恢复时要注意保暖，保持 1.6.2 脑组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，
呼吸道通畅。术后 3 组大鼠均腹腔注射硫酸庆大霉素 2 SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量检
U/ 只，连续注射 3 d，以预防感染。术后均腹腔注射呋 测 组织样本采集：Morris 水迷宫行为学测试结束后，
塞米注射液，剂量为 0.1 mg/kg，防止脑水肿。 抓取各组大鼠称重后采用 10% 的水合氯醛以 4 ml/kg 的
1.4 模型制备成功的标准 动物麻醉完全清醒后，按 剂量进行腹腔注射麻醉，麻醉成功后迅速断头取脑，用
照 Zea-Longa 法 ［13］ （0 分：无神经缺损症状，1 分：无 LEICA 手术刀片于冰上准确分离出梗死侧脑皮质，将其
法完全伸展对侧前爪，2 分：向右侧转圈，3 分：向对 放入预先配置的 4 ℃ PBS 溶液中漂洗血液，漂洗结束
侧倾倒，4 分：意识丧失，无法自发行走）对 MCAO 模 用滤纸吸干并适量等分称重，以重量与体积为 1∶9 的
型大鼠进行评分，筛选分值为 1~3 分的大鼠为成功的动 比例加入 4 ℃的 PBS 进行研磨。
物模型，纳入模型组、电针组。0 分和 4 分失败的动物 WST-1 法检测：研磨结束后，将各组样本置于冷