中国全科医学 ›› 2015, Vol. 18 ›› Issue (14): 1671-1674.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.14.017

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RNA干扰作用于HIV-1vpr基因的筛选实验研究

张权,周泉,何艳,龚国忠,郑煜煌,周华英,黄娜   

  1. 410011湖南省长沙市,中南大学湘雅二医院感染科
  • 出版日期:2015-05-15 发布日期:2015-05-15
  • 基金资助:
    湖南省科学技术厅科技计划项目(2014SK3097)

  • Published:2015-05-15 Online:2015-05-15

摘要: 目的  筛选鉴定针对HlV-1vpr基因的小干扰RNA(siRNA)片段。方法  根据siRNA设计要求合成siRNA56、siRNA160和siRNA185寡核苷酸片段,分别转染至含HIV-1vpr质粒的HEK293T细胞,并进行总RNA提取,采用Real-timePCR和Westernblotting分别从核酸和蛋白水平对HIV-1vpr基因表达水平进行验证。结果  siRNAs成功转染含HIV-1vpr质粒的HEK293T细胞,降低了HIV-1vpr基因的表达水平,其中在RNA水平siRNA160组干扰抑制作用最强,抑制率为89%;在蛋白水平siRNA56组干扰抑制作用最强,抑制率为96%。结论  3个基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平,但存在差异性,为探索HIV/AIDS基因治疗的可行性和高效性提供了可靠的实验依据。

关键词: RNA干扰, HIV-1, HIV-1vpr基因, HEK293T细胞