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           利用荧光检测仪测出 FIT/FIC 值即可在一定范围内初步
           定量检测。见图 12。
           3 讨论
               免疫层析技术是一种将抗原抗体特异度反应与色谱
           层析技术相结合的新型膜检测分析方法,是目前最常用
           的现场快速检测(POCT)检验技术。传统以胶体金为                                        图 11 稳定性实验检测数据图
           标志物的免疫层析检测方法虽然价格低廉、检测简便、                                    Figure 11 Data graph of stability experiment test
           肉眼直观可见,但其灵敏度和特异度方面均差强人意。


                          表 2  特异度实验测量表
                     Table 2  Specificity experiment test scale
             病毒      C线     T线     FIT/FIC  FIT/FIC 均值  结果
             229E   59 241  2 694  0.045 47  0.038 92   _
                    63 145  2 645  0.041 88
                    48 181  1 417  0.029 40
             NL63   91 811  663    0.007 221  0.011 2   _
                                                                                图 12 标准曲线图
                    75 561  1 167  0.015 45                                 Figure 12 Standard curve graph
                    77 317  845    0.010 92
                                                               新型荧光标记材料量子点具有荧光尺寸可调,发射光谱
            HKU1    73 395  1 869  0.025 47  0.018 14   _
                                                               窄而对称,高量子产率,宽吸收光谱,荧光强度高,耐
                    70 475  1435   0.020 36
                                                               光漂白和稳定性好等优点,在多联检测上是很有前途的
                    97 929  841    0.008 592                           [11]
                                                               纳米材料       。本研究表达了 SARS-CoV-2 具有诊断意
             OC43   53 188  1 569  0.029 50  0.029 85   _
                                                               义的抗原蛋白 -N 蛋白,并利用量子点作为标记材料标
                    62 453  1 513  0.024 23
                                                               记 N 蛋白,应用免疫层析技术原理制备了 SARS-CoV-2
                    64 301   2 304  0.035 831 5
                                                               IgG 抗体检测试纸条,能够在 10 min 左右检测出人血清
            MP-P1   22 859  872    0.038 14  0.020 67   _
                                                               中 IgG 抗体,与季节性冠状病毒 229E、NL63、HKU1、
                    20 388  101    0.004 953
                                                               OC43 及支原体、呼吸道合胞病毒等其他呼吸道病毒抗
                    28 102  532    0.018 93
                                                               体无交叉反应,重复性良好,预测其稳定性可于常温下
            RSV-F0  35 085  662    0.018 86  0.021 03   _
                                                               (25 ℃)保存 160 d。本试纸条检测灵敏度为 8.53~17.06
                    24 447  333    0.013 62                                                                 [12]
                                                               ng/ml,特异度为 100.00%,灵敏度为 94.29%。SHEN 等
                    22 412  686    0.030 60
                                                               评价了胶体金免疫层析法检测 SARS-CoV-2 抗体的效
            MV-NP   25 076  163    0.006 500  0.016 04  _
                                                               果,检测 97 例核酸 PCR 法阳性病例,胶体金法检测出
                    22 791  685    0.030 05
                                                               69 例阳性,灵敏度为 71.1%,检测 53 例核酸 PCR 法阴
                    36 817  426    0.011 57
                                                               性病例,胶体金法检测出 2 例阳性,特异度为 96.2%。
            RV-E1   43 036  800    0.018 58  0.009 195  _
                                                               由此可见,量子点免疫层析法相比胶体金性能更为优良,
                    31 194  122.5  0.003 927
                                                               其原因可能为胶体金法免疫层析通过肉眼观察结果,阳
                    34 702  176    0.005 071
                                                               性结果捕捉率偏低,而量子点等荧光材料通过发射荧光
              注:- 表示阴性
                                                               可被仪器采集荧光读取结果,结果可靠性更高。另外量
           表 3 N 蛋白抗体试纸条、ELISA 试剂盒与核酸检测方法学对比结果                 子点更优良的性能决定着其在免疫层析领域的应用必将
           Table 3 Comparison results of N protein antibody strip、ELISA kit and   广泛推广。
           nucleic acid detection methods
                                                                   同时,本课题研究具有一定的局限性,体现在样本
                    检测方法            总体样本数      核酸诊断(例)         数量较少,SARS-CoV-2 阳性血清样本有 35 例,且样
            免疫层析试纸条      ELISA 试剂盒    (例)      阳性     阴性
                                                               本血清中 IgG 抗体浓度未知,无法代表不同抗体浓度梯
                阳性          阳性          32      32     0
                                                               度的患者。另外,检测时也可能因为环境因素或样本血
                阳性          阴性          1       1      0
                阴性          阳性          2       2      0       清内其他干扰因子存在而出现假阳性。利用量子点免疫
                阴性          阴性          50      0      50      层析法制备了 SARS-CoV-2 N 蛋白抗体检测试纸条,操
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