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           H32024535）。                                         组大鼠于第 8 周末已成功建立 COPD 稳定期大鼠模型，
           1.4  试剂和仪器 大鼠酶联免疫吸附测定（ELISA）                        LPS 溶液浓度适宜，大鼠死亡率低。确定 COPD 稳定期
           试剂盒和大鼠 sIgA（E-EL-R0875c）购于武汉伊莱瑞                     大鼠模型的建立周期为 8 周，LPS 鼻腔内滴注的最佳浓
           特生物科技股份有限公司，苏木素伊红（HE）染色试                            度为 1 mg/kg 体质量，COPD 痰热证急性加重期的 LPS
           剂盒购于北京索莱宝科技有限公司，石蜡块、二甲苯溶                            最佳浓度为 2 mg/kg 体质量，急性加重持续时间为 6~8 d。
           液、无水乙醇和中性树脂购于国药集团，兔抗大鼠多克                            该模型的炎症特点、肺功能、肺形态学具有稳定性，适
           隆抗体 CD 3 （E-AB-40132）购于武汉伊莱瑞特生物科                    宜用于后续研究。
           技股份有限公司，兔抗大鼠多克隆抗体 CD 4 （K006374P）                   1.6.2 实验模型 COPD 稳定期模型：除对照组外，
           购于北京索莱宝科技有限公司，链霉亲和素 - 碱性磷                           其余组别给予 LPS 溶液以 1 mg/kg 体质量经鼻腔滴入，
           酸酶（SABC-AP）免疫组化染色试剂盒（SA1055）购                       2次 /周，持续 8周      ［13］ ；对照组大鼠滴入等体积 0.9%
           于武汉博士德生物工程有限公司。WBP 无束缚小动物                           氯化钠溶液。除对照组外，其余组别均进行香烟烟雾
           全身体积描记仪和 Fine PointeTM series PFT 检测系统购             暴露，采用有机玻璃熏烟箱，体积 189 L，烟雾浓度
           于美国谛思蔼贸易有限公司，烘箱购于上海新苗医疗                             （3 000±500）ppm，30 min/ 次，2 次 /d，间隔≥ 3 h，
           设备有限公司，BS210S 电子天平购于德国赛多利斯集                         持续 8 周；对照组大鼠置于通风良好的室内。经鼻腔滴
           团，LDZ5-2 离心机购于美国赛默飞世尔科技有限公司，                        入 LPS 溶液当天，不进行香烟烟雾暴露。模型成功标准
           RM2145 自动切片机购于德国徕卡显微系统贸易有限公                         依据预实验及文献［14］。
           司，YT-7F8 生物组织摊烤片机和 YB-6LF 生物组织石                         COPD 痰热证急性加重期模型：除对照组、COPD
           蜡包埋机购于湖北省孝感市亚光医用电子技术有限公                             组外，于造模第 9 周第 1 天起，将半数模型大鼠置于
           司，PM-10AD 光学显微镜及图像采集系统购于日本奥                         烘箱进行热暴露，温度（38±1）℃，湿度 50%，风速
           林巴斯销售服务有限公司，IVC- Ⅱ动物饲养笼具购于                          1 m/s，30 min/ 次，2 次 /d，间隔≥ 3 h，持续 9 d 模拟
           江苏省苏州市冯氏实验动物设备有限公司。                                 痰热证   ［14］ 。实验第 9 周第 6 天给予热暴露的大鼠鼻腔
           1.5 实验方法 大鼠适应性饲养 7 d，室温（25±1）℃，                     滴入 LPS 溶液 2 mg/kg 体质量模拟急性加重期。急性加
           湿度（50%±10%），换气量（15±5）次 /h，氨浓度                       重当天，不进行热暴露。
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           ≤ 14 mg/m ，噪声≤ 60 db。12 h 昼夜交替照明，自由                 1.7 药物干预 西药组、中西医结合组于造模第 9 周第
           饮纯水、饲料。采用 EXCEL RAND 函数法将 60 只大鼠                    7 天分别灌胃相应药物，急性加重期灌胃持续 8 d、稳
           随机分为对照组、COPD 稳定期（COPD）组、AECOPD                      定期灌胃持续 14 d     ［14］ ，对照组、COPD 组及 AECOPD
           组、西药组、中西医结合组。每日观察并记录大鼠一般                            组全程灌胃0.9%氯化钠溶液，各组药物干预计划见表1。
           情况，包括皮毛色泽，活动度，灵敏度，进食、进水量                            药物剂量采用等效剂量系数换算公式计算。D 大鼠 =D 人
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           等。本实验已通过河南中医药大学第一附属医院伦理委                            ×（HI 大鼠 /HI 人 ）×（W 人 /W 大鼠 ） 。注：D 为剂量，
           员会审批（批号：YFYDW2018015）。                              HI 为体型系数，W 为体质量。各药物灌胃剂量：通塞
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           1.6 模型制备                                            颗粒为 7.2 g·kg ·d ，补肺益肾方为 4.42 g·kg ·d ，
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           1.6.1 预实验 采用梯度浓度 LPS 溶液鼻腔内滴注联合                      盐酸莫西沙星片为 0.027 g·kg ·d ，硫酸沙丁胺醇片
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           香烟烟雾暴露法制备 COPD 稳定期 - 急性加重期模型，                       为 0.41 mg·kg ·d ；每周称量一次大鼠体质量，以调
           热暴露法模拟痰热证。80 只大鼠随机分为对照组、LPS                         整灌胃用量。
           0.5 mg 组、LPS 1.0 mg 组、LPS 2.0 mg 组，每组 20 只。         1.8 取材与指标检测 药物干预结束后取材，取材前
           第 0 周、第 4 周、第 8 周、第 12 周和模拟急性加重前，                   大鼠禁食 12 h，自由饮水。采用 3% 戊巴比妥钠（2.5
           检测肺功能并分析数据；第 8 周、第 12 周结束时，分                        ml/kg）腹腔麻醉，气管插管，检测肺功能，随后腹主
           批取材观察肺组织病理。除对照组、COPD 组外，第                           动脉采血并取材。
           13 周第 1 天起，半数模型大鼠进行热暴露并持续 9 d，                      1.8.1 体质量 每周称量大鼠体质量（g）。
           模拟痰热证。第 13 周第 6 天，将热暴露的大鼠鼻腔内                        1.8.2 肺功能造模 第 0、1、4、8 周和急性加重前分
           一次性滴注浓度加倍的 LPS 模拟急性加重期。第 13 周                       别使用 WBP 无束缚小动物全身体积描记仪检测潮气
           第 5 天起，每日检测所有大鼠肛温，隔日尾静脉采血，                          量（TV）、呼气峰流速（PEF）、50% 潮气量呼气流
           检测血常规各指标，血清 C 反应蛋白（CRP）和血清                          量（EF 50 ）；取材前使用 Fine PointeTM series PFT 检测
           淀粉样蛋白 A（SAA）表达水平至炎性指标恢复至接近                          FVC、FEV 0.3 ，计算 FEV 0.3 /FVC。
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           COPD 稳定期水平。                                         1.8.3 肺、肠组织 CD 3 和 CD 4 表达水平 取左肺经左
               综合肺组织病理、肛温、CRP 和 SAA，LPS 1.0 mg                 主支气管恒压灌注 10% 中性甲醛溶液 2 h，然后置于新
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