中国全科医学 ›› 2016, Vol. 19 ›› Issue (08): 925-930.DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2016.08.013
轩亚茹,应雪,张春春,王亚华,闫荷露,李霞
摘要: 目的 探讨表阿霉素(EPI)与替莫唑胺(TMZ)联合用药对C6脑胶质瘤细胞和细胞肿瘤球的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法 培养C6脑胶质瘤细胞,取对数生长期细胞活性>95%的细胞进行实验。取C6脑胶质瘤细胞接种于96孔细胞培养板中培养,24 h后加入各药液10 μl至细胞培养孔中,细胞培养孔中EPI浓度梯度为0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00 μmol/L,TMZ的浓度梯度为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 μmol/L,继续培养24 h和48 h。采用酶标仪在540 nm波长处测定每孔吸光度(OD)值,计算各孔C6脑胶质瘤细胞的抑制率。取C6脑胶质瘤细胞接种于6孔板中,加入EPI、TMZ、EPI+TMZ(EPI终浓度为0.50、1.00、5.00 μmol/L,TMZ终浓度为1.0、5.0、10.0 μmol/L),继续培养24 h和48 h,经流式细胞仪检测EPI和TMZ联合对C6脑胶质瘤细胞的凋亡作用。培养C6脑胶质瘤细胞肿瘤球,加入EPI、TMZ、EPI+TMZ,EPI终浓度为5.00 μmol/L,TMZ的终浓度为10.0 μmol/L,分别于给药后0、1、3、7 d于倒置显微镜下观察肿瘤球的形态、球体是否有裂解、球核是否有坏死等现象。结果 不同浓度的各药物在24、48 h对C6脑胶质瘤细胞增殖的抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05);各浓度EPI+TMZ联合用药对C6脑胶质瘤细胞增殖的抑制率均高于相同EPI或TMZ浓度下单独用药,差异均有统计学意义(P<0.05)。培养至24 h时,1.00 μmol/L EPI与5.0 μmol/L TMZ联合用药对C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制率呈协同作用;培养至48 h时,0.50 μmol/L EPI与1.0 μmol/L TMZ联合用药对C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制率呈协同作用。培养至24、48 h时,阴性对照、各浓度的EPI、TMZ及EPI+TMZ对C6脑胶质瘤细胞凋亡率的比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经EPI、TMZ及其联合用药后肿瘤球体积明显受到抑制,表现为体积缩小,表面细胞裂解;联合用药较单独用药后肿瘤球球体致密性减小,裂解程度增大。结论 EPI和TMZ联合用药对C6胶质瘤细胞具有协同抑制细胞增殖及诱导凋亡的作用,可引起C6脑胶质瘤细胞肿瘤球的裂解死亡。