摘要： 目的　深静脉血栓（DVT）形成涉及免疫炎症与凝血系统的交互作用，中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是连接两者的关键枢纽，但在血栓微环境中NETs的调控机制尚不明确。本研究旨在通过解析人DVT血栓不同微区域的分子特征，探讨乳酸在中性粒细胞NETosis中的作用机制。方法　采用激光显微切割联合质谱分析技术，对人DVT血栓组织中NETs富集区与NETs稀疏区进行分子特征比较；同时分离培养小鼠骨髓来源中性粒细胞，建立体外NETs释放过程（NETosis）模型，通过外源性乳酸及MCT1、HDAC和PAD4药物抑制剂进行干预，结合Sytox Green荧光检测、qPCR及Western blot检测方法，评估乳酸对NETosis的影响。结果　蛋白质组学结果显示，NETs富集区呈现中性粒细胞活化、炎症信号增强及凝血通路富集特征，同时糖酵解及乳酸代谢相关分子整体上调，提示乳酸可能参与NETs形成的调控。体外实验进一步证实，外源性乳酸可显著增强PMA诱导的中性粒细胞NETosis，并上调NETs相关分子的表达。机制研究表明，MCT1抑制剂可部分逆转乳酸介导的NETosis增强效应及组蛋白乙酰化水平，而HDAC抑制剂可进一步协同乳酸增强上述效应；PAD4抑制剂则可完全阻断NETosis，但主要下调CitH3表达，对H4K5ac及MCT1影响有限，提示乳酸通过MCT1-HDAC介导的表观遗传调控促进NETosis，并最终经PAD4途径促进NETs释放。结论　DVT血栓中NETs富集区域存在活跃的糖酵解与乳酸代谢特征，乳酸可通过MCT1/HDAC/PAD4信号轴促进NETosis并参与血栓微环境塑造与血栓稳定。

关键词: 深静脉血栓形成, 中性粒细胞胞外诱捕网, 乳酸代谢, 免疫血栓