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年龄，测定身高、体质量、血压，抽取研究对象清晨空 间比较采用成组 t 检验；非正态分布的计量资料以 M
腹外周静脉血常规送检于石河子大学医学院第一附属医 （P 25 ，P 75 ）表示，两组间比较采用 Mann-Whitney U 检
2
院检验科，使用 DT4-1B-24 孔医用水平离心机以 4 000 验；计数资料的分析采用 χ 检验；采用多元线性回归
r/min 离心 10 min，离心半径 15.6 cm，吸取离心管内上 分析探究 circRNAs 与 T2DM 临床生化指标的关系；采
清液 12 μl，根据 BECKMAN COULTER AU5800 系列全 用 Logistic 回归模型估计 circRNAs 的 2 -ΔΔCT 变化时汉
自动生化分析仪使用说明书测定空腹血糖（FPG）、果 族 T2DM 患病风险的改变量，同时绘制受试者工作特征
糖胺（FA）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密 （ROC）曲线，通过 ROC 曲线下面积（AUC）判断候
度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；采用罗氏 COBAS 8000 型 选 circRNAs 对 T2DM 的诊断价值。以 P<0.05 为差异有
电化学免疫分析仪测定空腹胰岛素（FINS）、空腹 C 统计学意义。
肽（CpS）。计算胰岛素稳态模型指数（HOMA-IR）， 2 结果
HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。 另 外 抽 取 外 周 静 脉 血 2.1 各组一般资料、生化指标及候选 circRNAs 相对表
5 ml，EDTA 抗凝，于 4 h 内提取单核细胞，取 EDTA 达水平比较 健康对照组和 T2DM 组性别、年龄、体
管内 1 ml 外周静脉血加 3 ml 红细胞裂解液（1∶3）置 质指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、
于离心管内充分混匀，室温静置 10 min，以 4 000 r/min FINS、CpS、HOMA-IR、LDL-C、HDL-C 比 较， 差
离心 5 min，离心半径为 12.3 cm，管底可见大量白色细 异均无统计学意义（P>0.05）；T2DM 组 FPG、FA 及
胞沉淀，弃去上清液，再次加入 1~3 ml 红细胞裂解液 hsa_circ_0032491、hsa_circ_0002922 相对表达水平均高
混匀，以 4 000 r/min 离心 3 min，离心半径 12.3 cm，弃 于健康对照组，hsa_circ_0005414、hsa_circ_0139634 均
去上清液，管底白色沉淀物按照 TRIZOL 试剂盒（美国 低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表 1。
Invitrogen 公司）说明书，提取血单核细胞的总 RNA。 2.2 多元线性回归分析探究 circRNAs 与糖代谢相关
采用 RT-PCR 方法检测各组样本中候选 circRNAs 指标的关系 以 4 个候选 circRNAs 的相对表达量为
（hsa_circ_0005414、hsa_circ_0139634、hsa_ 因变量，对所有入组人群使用前进法逐步引入糖代
circ_0032491、hsa_circ_0002922）水平，反应体系为 40 谢 相 关 指 标 FPG、FA、Log 2 FINS、CpS 为 自 变 量 进
个循环，先 95 ℃变性 1 s，再把温度降到 60 ℃、31 s 行 多 元 线 性 回 归 分 析， 结 果 显 示，hsa_circ_0005414
2
进行延伸反应，以管家基因ACTB（β-actin）作为内参照， 2 -ΔΔCT =1.835-0.171×FPG，R =0.290；hsa_circ_0139634
2
每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循 2 -ΔΔCT =1.878-0.438×FA，R =0.159；hsa_circ_0032491
2
环数为 CT 值，circRNAs 相对表达水平用 2 -ΔΔCT 表示， 2 -ΔΔCT =3.808+0.876×FPG-1.023×Log 2 FINS，R =0.503；
2
所有样本重复 3 次，取平均值，2 -ΔΔCT 越高，circRNAs hsa_circ_0002922 2 -ΔΔCT =0.170+0.281×FPG，R =0.168，
表达水平越高。 见表 2。
1.3 统计学方法 采用 SPSS 22.0 软件进行统计学分 2.3 候 选 circRNAs 诊 断 T2DM 的 ROC 曲 线 分 析
析。符合正态分布的计量资料以（ ±s）表示，两组 绘 制 候 选 circRNAs 诊 断 T2DM 的 ROC 曲 线， 结 果

表 1 各组一般资料、生化指标及 4 个候选 circRNAs 相对表达水平比较
Table 1 Comparison of general information，biochemical indicators and relative expression levels of four candidate circRNAs in T2DM Han Chinese and
healthy Han Chinese
性别 年龄 BMI SBP（ ±s， DBP（ ±s， FPG〔 ±s， FA〔M（P 25 ， FINS（ ±s， CpS（ ±s，
组别 例数 2
（男 / 女） （ ±s，岁） （ ±s，kg/m ） mm Hg） mm Hg） mmol/L〕 P 75 ），mmol/L〕 pmol/L） nmol/L）
健康对照组 22 11/11 53.9±5.0 24.2±2.1 132±19 77±11 4.86±0.50 1.51（1.38，1.63） 78.73±38.54 0.94±0.32
T2DM 组 21 12/9 54.9±6.1 25.1±2.9 130±16 81±8 9.21±2.40 2.77（2.21，3.20） 60.79±36.19 0.86±0.35
检验统计量值 0.220 a -0.559 -1.214 0.416 -1.376 -8.119 -5.614 b 1.571 0.723
P 值 0.639 0.579 0.232 0.680 0.176 <0.001 <0.001 0.124 0.474
HOMA-IR LDL-C HDL-C hsa_circ_0005414 hsa_circ_0139634 hsa_circ_0032491 hsa_circ_0002922
组别
〔M（P 25 ，P 75 ）〕 （ ±s，mmol/L） （ ±s，mmol/L） 〔M（P 25 ，P 75 ）〕 〔M（P 25 ，P 75 ）〕 〔M（P 25 ，P 75 ）〕 （ ±s）
健康对照组 2.31（1.14，2.95） 2.79±0.51 1.26±0.28 1.159（0.647，1.456） 1.025（0.698，2.050） 1.173（0.622，1.490） 1.108±0.497
T2DM 组 2.76（1.72，5.61） 2.77±0.66 1.30±0.22 0.046（0.023，0.081） 0.445（0.229，0.669） 5.395（3.837，9.310） 3.200±2.054
检验统计量值 -1.264 b 0.115 -0.598 -5.612 b -3.377 b -5.248 b -4.543
P 值 0.206 0.909 0.553 <0.001 0.001 <0.001 <0.001
注：T2DM=2 型糖尿病，BMI= 体质指数，SBP= 收缩压，DBP= 舒张压，FPG= 空腹血糖，FA= 果糖胺，FINS= 空腹胰岛素，CpS= 空腹 C 肽，
b
2
a
HOMA-IR= 胰岛素稳态模型指数，LDL-C= 低密度脂蛋白胆固醇，HDL-C= 高密度脂蛋白胆固醇； 表示 χ 值， 表示 Z 值，余检验统计量值为
t 值；1 mm Hg=0.133 kPa